Doctorat
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Item Caractérisation physico-chimique et microbiologique des grignons d'olives de quelques huileries en Algérie et essai de culture d'un microchampignon hyphomycète en vue de production d'enzymes(Université M'Hamed Bougara Boumerdès : Faculté des Sciences, 2024) Boutiche, Malika; Sahir-Halouane, Fatma(Directeur de thèse)La présente étude a pour objectif de caractériser (propriétés physico-chimiques et microbiologiques) des grignons d'olives provenant de quatre régions : Jijel, Bejaia, Tizi-Ouzou et Bouira, et de valoriser cette biomasse ligno-cellulosique en tant que substrat de culture pour la production de cellulases, en utilisant le champignon de Trichoderma reesei RUT C-30. Les résultats de la caractérisation physico-chimique ont montré que les grignons d'olive sont riches en fibres NDF (46,33% à 58,74%). La caractérisation microbiologique a révélé que ces sous-produits peuvent être un milieu très favorable à la croissance et le développement de T. reesei RUT C30. Ces grignons ont été colonisés principalement par la flore mésophiles aérobies totales et les levures et les moisissures dont la charge a varié de 0,45×105 à 1,36×107 UFC/ml et de 2×105 à 4,76×106 UFC/ml, respectivement. Parmi les quatre grignons testés, les grignons bruts de la région de Jijel ont révélé la meilleure production de cellulases (activité papier filtre = 0,78U/gSS). L'effet des trois traitements (alcalin, broyage et thermique) et de leurs combinaisons sur la composition physico-chimique et sur la production de cellulases a été étudié. Les résultats ont montrés que la composition chimique a été significativement affectée (P <0,05) par les différents traitements ainsi que leurs combinaisons. Le traitement alcalin (1% NaOH) des grignons a amélioré l'activité papier filtre à une valeur de 1,28UI / gSS, tandis que des rendements inférieurs ont été obtenus avec les traitements de broyage (0,2UI / gSS) et thermique (0,15UI / gSS). La modification des conditions de culture (épuisement des grignons à l'acétone) a montré une amélioration remarquable de l'activité papier filtre (2,63 UI/gSS) par rapport à celles enregistrés par les grignons non traités. Les résultats de l'analyse SDS-PAGE révèlent que l'extrait enzymatique brut contient deux complexes enzymatiques différents de cellulases et xylanasesItem Etude phytochimique et criblage des activités antifongique et entomocide des feuilles de deux plantes arboricoles cultivées : le noyer et l'olivier(Université M'Hamed Bougara Boumerdès : Faculté des Sciences, 2024) Bennacer, Amel; Sahir-Halouane, Fatma(Directeur de thèse)En Algérie, la culture du blé tendre (Triticum aestivum Linn.) joue un rôle crucial dans la chaîne alimentaire. Cependant, cette derniere est menacée par de multiples ravageurs en champs comme en stock, ce qui entraîne des pertes économiques substantielles. Ce travail avait pour principal objectif de valoriser les feuilles de deux plantes cultivées arboricoles : le Noyer commun et l'Olivier cultivé par l'exploration et l'exploitaion de molécules bioactives a effet antifongique et insecticide dans la lutte biologique contre deux principaux bioagresseurs infeodés au blé tendre stocké. L'extraction à partir des feuilles des deux plantes nous a permis d'obtenir des extraits flavonoiques et tanniques (14 extraits en totalité). L'analyse de la composition chimique de ces derniers a été effectuée par spectrophotomètre UV-Vis mettant en évidence les polyphénols totaux, les flavonoïdes, les tanins hydrolysables et les tanins condensés. L'analyse par chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (CGMS) et chromatographie liquide à haute performance couplée à la spectrométrie de masse (LCMS/MS) a permis la mise en évidence de la présence des acides phénoliques, acides gras, des composés terpéniques, des alcanes, des acides hydro-cinnamiques, des flavanoles, des flavones et des naphtoquinones. Une collection de 282 isolats fongiques appartenant à différents genres ont été isolés à partir des échantillons de blé tendre stocké issus des six régions du nord Algérien : Relizane, Blida, M'sila, Tizi Ouzou, Constantine et Batna. Deux principaux genres fongiques prédominent dans l'ensemble des isolats, il s'agit des genres Aspergillus spp. et Penicillium spp. Les souches appartenant à ces deux genres ont été identifiées par des moyens phénotypiques. L'identification moléculaire a été faite en séquençant deux types de génomes de la région espaceur interne transcrit (ITS) et de la région ?-tubuline. L'étude moléculaire a permis l'identification de quatre souches à savoir : A.niger, A.sclerotiorum, P.chrysogenum et T.funiculosus. L'activité antifongique des extraits de feuilles de J.regia L. et O.europaea var rougette vis-à-vis les isolats fongiques a montré que ces derniers ont une faible croissance mycélienne après 5 jours d'expositions aux extraits testés. Les extraits tanniques des deux plantes ont présentés les pourcentages d'inhibition de la croissance mycélienne les plus élevées (?75%). De plus, ces deux extraits offrent une meilleure inhibition de la germination des souches fongiques révélant des taux d'inhibition de 42.12% (TNJ) et de 50.18% (TNO). L'activité insecticide a été évaluée sur un insecte de denrées stockées le charançon de riz (Sitophilus oryzae L.). Le taux de mortalité atteint les 100% après 7 jours d'expositions aux extraits, les TL50/TL90 et les DL50/DL90 des extraits EPJ,BTJ, EPO et AEO sont les plus faibles.L'étude histologique des adultes de S.oryzae après 3eme jour du traitement par les extraits EPJ, BTJ, EPO et AEO à révélée la cytoxicité de ses derniers en comparaison avec le témoin négatif. Cette étude montre l'efficacité des procédés d'extration choisis et révéle le potentiel antifongique et insecticide des concentrations des traitements ciblés.Item Evaluation de la bioactivité de deux agents microbiens de lutte contre les larves du moustique vecteur d'arboviroses(Université M'Hamed Bougara Boumerdès : Faculté des Sciences, 2023) Ould Taleb, Rafik; Sahir-Halouane, Fatma(Directeur de thèse)Des travaux au laboratoire ont été menés pour évaluer la pathogénicité de six souches de champignons provenant, de sols rhizosphériques algériens, contre le 3 ème stade larvaire de Culex pipiens en vue de rechercher des candidats potentiellement intéressants en tant que mesure de lutte alternative aux insecticides chimiques. Les six souches fongiques ont été isolées sur les milieux « gélose dextrosée à la pomme de terre » et « complete medium agar » contenant chacun 1g d’extrait de levure, 0,1 g/L de cyclohéximide, 0,5 g/L de chloramphénicol et 0,6 g/L cetyl trimethyl ammonium bromide. Sur la base de la morphologie et du séquençage du gène ITS, elles ont été assignées aux espèces Purpureocillium lavendulum (RS10B, RS7 et RS5) et P. lilacinum (RS10A, B8 et MICH1). Ces deux espèces ont été isolées pour la première fois en Algérie et jusqu'à présent, aucune étude n'a rapporté la virulence de P. lavendulum contre le Cx. pipiens. La sensibilité des larves de ce moustique aux souches de P. lavendulum (RS10B, RS7 et RS5) et P. lilacinum (RS10A, B8 et MICH1) a été testée aux concentrations de 1×10 et 1×10 8 conidies/mL. A l’exception de la souche P. lilacinum (B8) qui n’a pas été sélectionnée pour une étude plus approfondie, toutes les autres souches ont présenté, à un degré variable, un effet larvicide. Les résultats ont révélé que P. lavendulum (RS10B) et P. lilacinum (RS10A) ont montré les temps létaux TL 50 (1,58 et 2 jours, respectivement) et TL 90 (4,95 et 3,90 jours, respectivement) les plus bas à 10 8 conidies/mL, suivi de RS7, MICH1 et RS5 avec des TL 50 sans différences significatives. Les valeurs de la concentration létale médiane CL 50 se sont avérées être de 2,81×10 6 conidies/mL pour RS10A, 2,86×10 6 conidies/mL pour RS10B, tandis qu'elles étaient de 9,92×10 6 conidies/mL pour RS7, 7,56×10 6 6 Résumé , 1×10 pour MICH1 et 1,51×10 conidies/mL pour RS5. D’après nos données, P. lavendulum (RS10B) et P. lilacinum (RS10A) ont été les plus efficaces en raison des valeurs relativement faibles de la concentration létale médiane (CL 50 ) et des temps létaux TL 50 et TL 90 . Leur effet biologique a été confirmé par une étude histopathologique montrant d’une part la prolifération des hyphes et la présence des conidies dans l’intestin moyen et d’autre part les altérations occasionnées par cette infection fongique sur les organes de la larve de Cx. pipiens. Notre travail a permis de mettre en évidence pour la première fois l’activité larvicide de P. lavendulum sur le Cx. pipiens